乙型肝炎表面抗体

基本信息

专科分类： 传染病检查
检查分类： 血液检查
适用性别： 男女均适用
是否空腹： 　空腹
手术参考价： 10元
科　室： 传染病检查

乙型肝炎表面抗体检查简介

HBV感染和免疫注射HBV疫苗都可产生乙型肝炎表面抗体(HBsAb)。HBsAb有IgM和IgG两型，前者发生在感染早期，后者发生稍后，它是一种保护性抗体，有良好的中和作用，并能在血清中长期存在。

乙型肝炎表面抗体检查过程

取材：血液

乙型肝炎表面抗体的测定原理：采用纯化HBsAg包被反应板，加入待测标本，同时加入HBsAg-HRP，当标本存在抗-HBS时，该抗-HBS与包被HBsAg结合并与酶结合物形成HBsAg-抗HBS-HBsAg-HRP复合物，加入TMB底物产生显色反应，反之则无显色反应。

试剂：0.05mol/L碳酸盐缓冲液，pH9.6（Na2CO30.16g、NaHCO30.29g，NaN30.02g，加蒸馏水至1000ml，4℃保存）；0.05mol/LPBS-Tween20缓冲液，pH7.4（NaCl8g，KH2PO40.2g，NaH2PO4·12H2O2.9g，KCl0.2g，Tween200.5ml，加蒸馏水至1000ml）；0.02mol/LTris-HCl-Tween20缓冲液，pH7.4（Tris2.42g，1mol/LHCl3ml，Tween0.5ml，加蒸馏水至1000ml）。抗HBs·IgG（包被用），辣根过氧化酶标记抗HBs（抗HBs·HRP）和底物（邻苯二胺）随药盒配备或自购。

操作方法：

（1）取用碳酸盐缓冲液作适当稀释的抗HBs·IgG（用抗HBs血清自提或随药盒配备）包被聚苯乙烯反应板，每孔加0.1ml（最后1孔不加，作为空白）。加盖，放4℃24h。次日用Tris-HCl-Tween20缓冲液洗涤3次，最后将板倒置于吸水纸上，使各孔液体流尽。

（2）各孔加入待测血清0.1ml（观察滴度可作不同稀释）。每板同时做阳性血清和阴性血清对照。加盖，置37℃2h后移去各孔液体，如上法洗涤3次。

（3）各孔加入底物溶液（0.1mol/LNa2HPO45.14ml，0.05mol/L枸橼酸4.86ml，邻苯二胺4mg，3%H2O20.05ml，避光，临用时配制）0.1ml，置室温暗处15～30min。待阳性对照孔充分显色后，各孔加入2mol/LH2SO40.05ml终止反应。