北京协和医院
三级甲等综合医院国营
北京协和医院是集医疗、教学、科研于一体的现代化综合三级甲等医院,是国家卫生健康委指定的全国疑难重症诊治指导中心,最早承
(1)样品提取同前列腺素测定法。
(2)取8mm×75mm玻璃管,总计数管(T)加PBS300μl,非特异结合管(NSB)加PBS200μl,零标准管(S0)加PBS100μl,标准曲线管(S1~7)加不同浓度标准工作液100μl,测定管加经纯化样品液100μl。
(3)向S0、S1~7和测定管加稀释抗血清100μl,放4℃6~12h。
(4)向所有管各加[3H]-TXB2工作液100μl,放4℃6~12h。
(5)除T管外,各加活性炭分离剂100μl,混匀后放4℃15min,离心3500r/min(4℃)15min。
(6)将上清液全部倾出至预先加有11ml闪烁液的计数瓶中,充分混合,放置12h后在液体闪烁计数器上测量放射性。
(7)在半对数坐标纸上以LogitB/B0为纵坐标,各标准管TXB2(pg)为横坐标,按直线回归法绘制标准曲线,然后依样品管的LogitB/B0值从标准曲线上求出样品管浓度,如液体闪烁计数器带有数据处理系统,可直接给出标准曲线,有关参数及样品管浓度。
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