胰岛素原

基本信息

专科分类： 生长发育检查
检查分类： 血液检查
适用性别： 男女均适用
是否空腹： 　空腹
手术参考价： 40元
科　室： 生长发育检查

胰岛素原检查简介

人胰岛素原(proinsulin)是胰岛素的前体物质，由胰岛素和C肽组成，具有双重免疫活性，既可与胰岛素抗体结合，又可与C肽抗体结合。胰岛素原由胰岛β细胞合成和分泌，主要在肾脏分解代谢。生理情况下，只有极少量的胰岛素原释放入血，在病理情况下，胰岛β细胞释放胰岛素原增多，血中胰岛素原水平升高。

胰岛素原检查过程

（1）胰岛素碘标记物制备和纯化：

①取Na125I3.7×107Bq置于含胰岛素2μg（20μl）的反应管内。

②加氯胺T溶液10μl。

③立即盖紧，轻敲小管使试剂快速混和。

④12～15s后，加偏焦亚硫酸钠溶液25μl（62.5μg）。

⑤把管内容物加至SephadexG-50柱上，用测定缓冲液洗涤，每管0.5ml收集45管，再用γ计数器计数。第一峰为125I标记的活性胰岛素，第二峰是没有结合的放射性碘。

（2）标记激素的免疫反应性估价：取第一峰收集物，以测定缓冲液稀释至5000cpm/0.1ml，取0.1ml该标记物于小试管中，加入过量抗血清（0.1ml）及0.1ml测定缓冲液，在4℃温育24h，然后加1ml葡聚糖活性炭悬浮液，在适当搅拌后，试管在4℃静止15min，然后再离心15min，丢弃上清液，计数沉淀，沉淀计数应少于加入量的5%，如计数增加，指示125I-胰岛素破坏。

（3）抗血清滴定：将抗血清系列稀释，从1∶320000至1∶10000测定时，在小试管中加0.1ml测定缓冲液，0.1ml稀释的抗血清，0.1ml稀释的标记胰岛素。在4℃温育20h，然后加1ml葡聚糖活性炭，适当搅拌后，在4℃温育15min后，再离心15min。丢弃上清液，测量沉淀物放射性计数，计数以加入量（F/T%）的35%～60%为合适的抗体稀释度。

（4）胰岛素测定：标准管与测定管做双份，具体操作如下表（表1）：